産品介紹
NcmBlot blocking buffer(快速封閉液)是(shì)一(yī / yì /yí)種即用型,高效快速應用于(yú) Western Blot 等實驗的(de)封閉液。封閉 時(shí)間僅需 10 分鍾,效果優于(yú)脫脂奶粉、BSA、酪蛋白等傳統封閉液,獲得更高的(de)信号,更低的(de)背景值,信噪 比高。該試劑不(bù)含有哺乳動物來(lái)源的(de)蛋白成分,避免與抗體發生交叉反應,适用于(yú)磷酸化的(de)抗體,但不(bù)可用 于(yú)生物素标記的(de)抗體。
産品特色
即用型封閉液,無需配制 封閉時(shí)間短,僅需 10 分鍾 背景低,信噪比高,優于(yú)常規奶粉等封閉的(de)效果 不(bù)含哺乳動物來(lái)源的(de)蛋白,适用于(yú)磷酸化的(de)抗體
操作步驟
1. 完成轉膜後,将膜移入到(dào)平皿或者其他(tā)适合的(de)容器中(可以(yǐ)不(bù)洗滌膜)。 2. 根據膜的(de)大(dà)小,加入适量體積的(de) NcmBlot Blocking Buffer 封閉液,需完全浸沒覆蓋膜,對于(yú) 7.5x 8cm 的(de)膜推薦使用量 5-10ml。 3. 置于(yú)水平搖床上(shàng),室溫條件下振蕩孵育 10 分鍾。 4. 取出(chū)封閉完成的(de)膜,用洗滌液沖洗蛋白膜 2-3 次,即可用于(yú)一(yī / yì /yí)抗孵育等後續 western blot 實驗。
保存條件
4℃保存,冰袋運輸,至少 1 年有效;
注意事項
1. 通常用于(yú) PVDF 膜或 NC 膜的(de)封閉時(shí)間爲(wéi / wèi) 10 分鍾。對于(yú)背景低的(de)抗體,可以(yǐ)縮短到(dào) 5 分鍾,而(ér)對于(yú)一(yī / yì /yí)些背景 非常高的(de)抗體,可以(yǐ)嘗試将封閉時(shí)間延長爲(wéi / wèi) 30-60 分鍾。 2. 沒有任何一(yī / yì /yí)種封閉液是(shì)适用于(yú)所有實驗體系的(de),因此對于(yú)一(yī / yì /yí)些特殊的(de)實驗或抗體,可能需要(yào / yāo)具體情況考慮使 用其它更合适的(de)封閉液,比如奶粉、BSA 等封閉試劑。 3. 信号弱或者無信号:有可能是(shì)上(shàng)樣量不(bù)足;轉膜效率低;抗體效價低,特異性差等原因造成,需要(yào / yāo)根據實驗 情況進行調整 4. 背景高:有可能是(shì)抗體使用量過多;蛋白膜洗滌時(shí)間不(bù)足;抗體和(hé / huò)封閉液發生交叉反應;試劑或儀器設備被 污染等原因造成,需要(yào / yāo)根據實驗具體情況進行調整。 5. 本産品僅限于(yú)科研使用,實驗時(shí)請穿實驗服并戴一(yī / yì /yí)次性手套操作。
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